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肝星狀細胞常用的制備方法分享

更新時間:2023-11-14點擊次數(shù):745
  肝星狀細胞是一類非專業(yè)免疫細胞,主要分布在肝臟的間質(zhì)空間中。它們富含維生素A,并以其特殊的星形外觀而得名。在正常情況下,它處于靜止狀態(tài),并參與調(diào)節(jié)肝臟的生理功能,如合成和儲存膠原蛋白、調(diào)控血管張力等。然而,在肝臟損傷或疾病發(fā)展過程中,肝星狀細胞會被激活并轉化為纖維母細胞樣表型,參與了纖維化反應和組織修復過程。
 

 

  為了深入了解其生物學特性以及在肝臟疾病中的作用機制,科學家們開展了大量的實驗研究,并提出了多種制備方法。其中,常用的方法是從小鼠或人類肝臟組織中分離和培養(yǎng)肝星狀細胞。
 
  首先,需要獲取新鮮的肝臟組織樣本。對于小鼠實驗,可以通過解剖小鼠并迅速取出肝臟來獲取樣本。對于人類實驗,通常從手術切除的肝臟組織中獲取樣本。然后,將組織切成小塊,并使用消化酶(如胰蛋白酶)進行消化。消化后的細胞懸液經(jīng)過離心分離,得到一個包含多種細胞類型的混合物。
 
  接下來,利用密度梯度離心法將混合物進行分層。這一步可以根據(jù)不同細胞類型的密度差異將肝星狀細胞與其他細胞分離開來。通常采用50% Percoll溶液制備密度梯度,并在高速離心后收集位于特定密度層上的細胞。
 
  分離得到的細胞可以通過培養(yǎng)在適當?shù)呐囵B(yǎng)基中進行擴增和傳代。培養(yǎng)基通常包含適當濃度的血清、營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子,以提供細胞所需的營養(yǎng)和生長條件。在培養(yǎng)過程中,它會逐漸失去其星形外觀,并轉化為纖維母細胞樣表型。
 
  肝星狀細胞的制備方法不僅在科學研究中有重要意義,還在臨床應用中具有潛力。由于它參與了肝臟纖維化的發(fā)生和發(fā)展,研究人員可以利用制備得到的肝星狀細胞來探索抗纖維化藥物的篩選和評估。此外,還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的靶向載體,在治療肝臟相關疾病時發(fā)揮作用。
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